Elettroforesi del DNA per la Determinazione della Paternità in Laboratorio

Relazione di Laboratorio di Microbiologia

Alunna: Aluevbose Victory Osarugue
Classe: 5F

Titolo: IL DOPPIO TEST MR-VP (Metile Rosso - Voges-Proskauer)

Scopo: Individuare il padre di un bambino tra padri ipotetici.

Parte Teorica

L’elettroforesi è una tecnica che permette di separare molecole, come frammenti di DNA, in base alla loro dimensione e carica. Applicando un campo elettrico su un gel, le molecole migrano: quelle più piccole corrono più velocemente, quelle più grandi più lentamente, formando un disegno di bande facilmente confrontabile.

Nel campo dello studio genetico, l’elettroforesi riveste un ruolo fondamentale perché consente di osservare i profili di DNA ottenuti tramite tecniche come la PCR (reazione a catena della polimerasi). Per un test di paternità, vengono amplificate regioni specifiche del DNA chiamate STR (Short Tandem Repeats), che variano da individuo a individuo. Dopo l’amplificazione, i frammenti vengono separati con l’elettroforesi: il risultato è uno schema di bande che rappresenta il profilo genetico della persona analizzata.

Confrontando le bande del figlio con quelle della madre e del presunto padre, si verifica se il bambino ha ereditato metà dei suoi segmenti da ciascun adulto. La corrispondenza delle bande indica compatibilità, mentre l’assenza di corrispondenze esclude la paternità.

Interpretazione dei risultati

• Bande del figlio compatibili / bande presenti nel presunto padre: ogni banda del figlio che non proviene dalla madre compare anche nel profilo del presunto padre. Questo indica compatibilità con la paternità.
• Bande del figlio non compatibili / bande assenti nel presunto padre: se una banda del figlio non è presente né nella madre né nel presunto padre, si parla di incompatibilità genetica e il soggetto maschile viene escluso come padre biologico.
• Tutte le bande corrispondenti / nessuna discrepanza: quando tutte le bande del figlio trovano corrispondenza nella madre o nel presunto padre, il risultato è pienamente compatibile con la paternità.
• Più bande non corrispondenti: la presenza di diverse bande del figlio non presenti nel presunto padre indica un’evidente incompatibilità e consente di escludere con sicurezza la paternità.

Conclusione

L’esperimento ha permesso di separare e visualizzare chiaramente i frammenti di DNA dei campioni mediante elettroforesi e colorazione con FlashBlue. L’osservazione al transilluminatore ha evidenziato bande nitide e ben definite, permettendo un confronto diretto tra i profili genetici. Dallo studio delle corrispondenze, è emerso che le bande del presunto padre 1 coincidono con quelle del bambino, confermando così la sua paternità. L’intera procedura si è svolta correttamente e i risultati ottenuti confermano l’efficacia del protocollo seguito.

Materiali e Reagenti

Procedimento

Preparazione del gel agarosio e Tampone di corsa

Caricamento dei campioni e corsa elettroforetica

Colorazione e decolorazione del gel con FlashBlue

Osservazione del Risultato

• Posizionare il gel sul transilluminatore per visualizzare le bande di DNA.
• Controllare la nitidezza e il contrasto delle bande rispetto al fondo del gel.
• Confrontare i profili genetici dei campioni tra loro.
• Verificare la corrispondenza delle bande della madre, presunto padre 1 e presunto padre 2 con quelle del bambino.
• Notare le corrispondenze.